Kolika je dubina polja na mikroskopu?

Dubina polja (DOF) mikroskopa je raspon udaljenosti od leće objektiva na kojem se objekti pojavljuju u oštrom fokusu. Određuje se numeričkom aperturom (NA) leće objektiva i valnom duljinom korištene svjetlosti.

DOF je obrnuto proporcionalan NA, što znači da objektiv objektiva s višim NA ima manji DOF. To je zato što leća objektiva s većom NA ima uži konus svjetla, što znači da se fokusira na manju površinu uzorka.

DOF je također obrnuto proporcionalan valnoj duljini svjetlosti, što znači da kraća valna duljina svjetlosti ima manji DOF. To je zato što se kraće valne duljine svjetlosti lakše difragiraju, što znači da se više šire dok prolaze kroz leću objektiva.

DOF mikroskopa je važan jer određuje debljinu uzorka koji se može promatrati u oštrom fokusu. Uzorak koji je deblji od DOF-a izgledat će mutno ili izvan fokusa.

DOF se može povećati korištenjem objektiva s nižom NA ili korištenjem veće valne duljine svjetlosti. Međutim, to će također smanjiti rezoluciju mikroskopa. Stoga je važno pronaći ravnotežu između DOF-a i rezolucije pri odabiru objektiva za određenu primjenu.

DOF mikroskopa može se izračunati pomoću sljedeće formule:

$$ DOF =\frac{2(n/NA)^2}{\lambda} $$

Gdje:

* DOF je dubina polja u mikrometrima

* n je indeks loma imerzijskog medija

* NA je numerički otvor objektiva

* λ je valna duljina svjetlosti u mikrometrima